美利体育登录入口官网:SN/T 5864-2025
出口肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌美利体育登录入口官网方法 EMA-芯片式数字PCR法
Method for Detecting Listeria monocytogenes in Exported Meat Products Using EMA-Chip Digital PCR
SNT5864-2025, SN5864-2025
- 标准号
- SN/T 5864-2025
- 别名
- SNT5864-2025, SN5864-2025
- 发布
- 2025年
- 国际标准分类(ICS)
- 07.100.30 食品微生物学
- 总页数
- 11页
- 发布单位
- 行业标准-出入境检验检疫
- 当前最新
- SN/T 5864-2025
- 引用标准
- GB 19489 GB 4789.30 GB/T 27403 GB/T 6682
- 本体
- 单核细胞增生李斯特氏菌
- 适用范围
- 本文件描述了出口肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌的 EMA 结合芯片式数字 PCR 美利体育登录入口官网方法。本文件适用于出口肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌 (活菌) 的快速定性美利体育登录入口官网。
| 术语 | 描述 |
|---|---|
| 芯片式数字 PCR chip digital PCR | 基于微反应室/孔板的数字 PCR 系统，在荧光 PCR 基础上发展起来，通过高密度纳升级反应阵列将单个 DNA 分子转移至独立反应室，经扩增后对荧光信号美利体育登录入口官网分析，结合阳性率和泊松分布计算实现单分子绝对定量。 |
| 黑洞淬灭基团 black hole quenchers (BHQ) | 一种荧光淬灭基团，在探针 3'端标记以抑制荧光信号，仅在探针被切割后释放报告荧光。 |
| 叠氮溴化乙锭 ethidium monoazidebromide (EMA) | 一种光激活染料，能选择性渗透损伤菌或死菌的细胞膜，与 DNA 发生共价交联从而阻断其 PCR 扩增，用于区分活菌和死菌。 |
| 溶血素基因 hemolysin gene (hly) | 单核细胞增生李斯特氏菌的特征性基因，本方法中通过美利体育登录入口官网该基因的保守区来特异性识别和鉴定目标菌株。 |
| 聚合链反应 polymerase chain reaction (PCR) | 一种在体外扩增特定 DNA 片段的技术，本方法中结合 cdPCR 系统用于美利体育登录入口官网 hly 基因的存在。 |
| 二甲基甲酰胺 N,N-dimethylformamide (DMF) | 一种有机溶剂，本文件中用于溶解叠氮溴化乙锭配制 EMA 工作液。 |
美利体育登录入口官网: SN/T 5864-2025 中提到的仪器美利体育官网首页网址
| cdPCR 系统 含仪器配套耗材 | 包含自动加载芯片及读取分析功能的集成系统，用于执行芯片式数字 PCR 美利体育登录入口官网。 |
| 卤钨灯 500 W | 用于对添加 EMA 的样品进行光照激活，使死菌 DNA 交联阻断。 |
| 恒温水浴锅 室温～100℃ | 用于酶解反应（蛋白酶 K、RNA 酶处理）及保温步骤。 |
| 高速台式冷冻离心机 转速 ≥12000 r/min | 用于样品制备过程中菌体沉淀的离心分离步骤。 |