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本品系用鲨乱毒素B亚单位基因重组质粒（pMM-CTB）转化大肠埃希菌MM2，使其高效表达霍乱毒素B亚单位（CTB)，经纯化、冻干制成干粉；O1群霏乱弧菌经培养、灭活、冻干制成菌粉。将两者混合后加人适宜辅料制成肠溶胶囊，用于预防霍乱和产毒性大肠埃希菌旅行者腹泻。

生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”及国家生物安全防护的有关规定。

2.1原液
2.1.1混合前原液
2.1.1.1霍乱菌体原液
应符合本品种附录1“霍乱菌体原液制造及检定要求”中1项的规定。
2.1.1.2重组霍乱毒索B亚单位原液
应符合本品种附录2“重组霍乱毒素B亚单位原液制造及检定要求”中1项的规定。
2.1.2原液检定
2.1.2.1霍乱菌体原液
应符合本品种附录1“霍乱菌体原液制造及检定要求”中2项的规定。
2.1.2.2重组霍乱轟素B亚单位原液
应符合本品种附录2“重组霍乱毒素B亚单位原液制造及检定要求”中2项的规定。
2.1.3原液冻干
2.1.3.1霍乱菌体冻干粉
将霍乱菌体原液用稀释液稀释后，冷冻干燥制成 菌粉。
2.1.3.2重组霍乱毒素B亚单位冻干粉
将重组霍乱毒素B亚单位原液用稀释液稀释后，冷 冻干燥制成冻干粉。
2.2半成品
2.2.1配制
将翟乱菌体冻干粉、重组霍乱毒素B亚单位冻干粉与适宜辅料按一定比例混匀制成药粉，使每粒（240mg）含霍乱菌体5.0×10l个，重组霍乱毒素B亚单位1mg；用于制备胶囊。
2.2.2半成品检定
按3.1项进行.
2.3成品
2.3.1分批
应符合生物制品分包装及贮运管理（通则0239）的规定。
2.3.2分装
应符合生物制品分包装及贮运管理（通则0239）与胶囊剂（通则0103）有关规定，
2.3.3规格
每粒胶囊装量240mg，含灭活霜乱菌体5.0×10个、重组霜乱毒素B亚单位lmg。
2.3.4包装
应符合生物制品分包装及贮运管理（通则0239）与胶囊剂（通则0103）有关规定，

3.1半成品检定
微生物限度
依法检查（通则1105、通则1106、通则1107），应符合规定。
3.2成品检定
3.2.1鉴别试验
3.2.1.1染色镜检
应为革兰阴性短小弧形杆菌。
3.2.1.2免疫双扩散法
采用免疫双扩散法（通则3403），供试品应与兔抗CTB血清产生与对照品一致的沉淀线。
3.2.2物理检查
3.2.2.1 外观
胶囊内药粉为淡黄色或浅褐色均匀粉末。
3.2.2.2装量差异
依法检查（通则0103），应符合规定、
3.2.3崩解时限
依法检查（通则0921），应符合规定：
3.2.4干燥失重
依法检查（通则0831），胶囊内容物在80℃干烤至恒重，减失重量应不得超过5.0%。
3.2.5重组霍乱毒素B亚单位（CTB）含量
采用免疫单扩散法测定，CTB含量应为标示量的100%～200%。
用0.9%氯化钠溶液将重组翟乱毒素B亚单位(CTB）标准品稀释至适宜稀释度，将胶囊内容物用0.9%氯化钠溶液稀释至每1ml含CTB约30μg的供试品溶液，分别加人含适量CTB抗血清的凝胶板中，置湿盒内，于37℃孵育扩散适宜时间，染色至沉淀圈显色消晰，用脱色液脱去背景颜色后，测量各沉淀圈的直径，以标准品浓度对数值为纵坐标、对应沉淀圈直径的平均值为横坐标作直线回归，求得直线回归方程。将供试品沉淀圈直径的值代人回归方程，计算供试品的浓度。
3.2.6微生物限度
按3.1项进行。
3.2.7免疫力试验
采用间接酶联免疫法美利体育登录入口官网免疫组小鼠血清抗体水平，与对照组小鼠血清相比较，免疫组小鼠鲨乱弧菌抗体滴度应不低于对照组4倍，免疫组小鼠CTB抗体滴度应不低于对照组8倍。
取胶囊内容物，用磷酸盐缓冲液（pH7.4稀释至每1ml含菌1.0×10个，免疫体重10～12g小鼠至少10只，每只腹腔注射2次，每次0.5ml（含菌5.0×10个），间隔7天；对照组注射液为磷酸盐缓冲液（pH7.4）。末次免疫后3～7天眼窝取血，分离血清并将免疫组各只小鼠血清和对照组各只小鼠血清分别等量混合。用含10小牛血清和0.1%聚山梨酯20的磷酸盐缓冲液（pH7.4）将上述血清分别稀释400倍待用。
将上述免疫血清稀释至适宜稀释度，以未免疫组小鼠血清为对照，采月间接酶联免疫法分别测定免疫血清中霜乱弧菌抗体和CTB抗体。计算对照组小鼠血清吸光度值的均值(X)+3倍标准差(SD)，选取免疫组小鼠血清系列稀释度中吸光度值大于对照组（X）＋3倍标准差（SD）的最大稀释倍数，以此最大稀释倍数除以对照组血清稀释倍数，得到免疫组小鼠抗体滴度倍数。

于2～8℃干燥保存和运输。自生产之日起，有效期24个月。

应符合生物制品分包装及贮运管理（通则5239）规定和批准的内容。

附录1雀乱菌体原液制造及检定要求
附录2重组霍乱毒素B亚单位原液制造及检定要求