美利体育登录入口官网:川贝母
说明
本品概说Chuanbeimu FRITILLARIAE CIRRHOSAE BULBUS
本品为百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosa D.Don、暗紫贝母Fritillaria unibracteata Hsiao et K.C.Hsia、甘肃贝母Fritillaria przewalskii Maxim.、梭砂贝母FritillariadelavayiFranch.、太白贝母Fritillaria taipaiensisP.Y.Li或瓦布贝母Fritillaria unibracteata Hsiao etK.C.Hsiavar.wabuensis(S.Y.Tang et S.C.Yue) Z.D.Liu,S.WangetS.C.Chen的干燥鳞茎。按性状不同分别习称“松贝”“青贝”“炉贝"和“栽培品”。夏、秋二季或积雪融化后采挖，除去须根、粗皮及泥沙，晒干或低温干燥。
性状
外观 · 质地 · 气味松贝呈类圆锥形或近球形，高0.3～0.8cm，直径0.3～0.9cm。表面类白色。外层鳞叶2瓣，大小悬殊，大瓣紧抱小瓣，未抱部分呈新月形，习称“怀中抱月”；顶部闭合，内有类圆柱形、顶端稍尖的心芽和小鳞叶1～2枚；先端钝圆或稍尖，底部平，微凹人，中心有1灰褐色的鳞茎盘，偶有残存须根。质硬而脆，断面白色，富粉性。气微，味微苦。
青贝呈类扁球形，高0.4～1.4cm，直径0.4～1.6cm。外层鳞叶2瓣，大小相近，相对抱合，顶部开裂，内有心芽和小鳞叶2～3枚及细圆柱形的残茎。
炉贝呈长圆锥形，高0.7～2.5cm,直径0.5～2.5cm。表面类白色或浅棕黄色，有的具棕色斑点。外层鳞叶2瓣，大小相近，顶部开裂而略尖，基部稍尖或较钝。
栽培品呈类扁球形或短圆柱形，高0.5～2cm，直径1 extasciitilde2.5cm。表面类白色或浅棕黄色，稍粗糙，有的具浅黄色斑点。外层鳞叶2瓣，大小相近，顶部多开裂而较平。
鉴别
显微 · 理化 · 色谱鉴别取本品粉末10g，加浓氨试液10ml,密塞，浸泡1小时，加二氯甲烷40ml,超声处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解。
取贝母素乙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。
硅胶G薄层板，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液-水（18：2：1：0.1)为展开剂。
吸取供试品溶液1～6μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，依次喷以稀碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本品0.1g，依次用75%乙醇1ml、灭菌超纯水1ml清洗，吸干表面水分，置乳钵中研磨成极细粉。取20mg，置1.5ml离心管中，用新型广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒提取DNA。
另取川贝母对照药材0.1g，同法制成对照药材模板DNA溶液。
加人缓冲液AP1400pl和RNA酶溶液(10mg/ml)4μl,涡旋振荡,65℃水浴加热10分钟，加人缓冲液AP2130μl,充分混匀，冰浴冷却5分钟，离心(转速为每分钟14000转)10分钟；吸取上清液转移入另一离心管中，加入1.5倍体积的缓冲液AP3/E,混匀，加到吸附柱上，离心(转速为每分钟13000转)1分钟，弃去过滤液，加人漂洗液700μl,离心(转速为每分钟12000转)30秒，弃去过滤液；再加入漂洗液500μl，离心(转速为每分钟12000转)30秒，弃去过滤液；再离心(转速为每分钟13000转)2分钟，取出吸附柱，放入另一离心管中，加人50μl洗脱缓冲液，室温放置3～5分钟，离心(转速为每分钟12000转)1分钟，将洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，离心（转速为每分钟12000转)1分钟。取洗脱液，作为供试品溶液，置4℃冰箱中备用。
5'-CGTAACAAGGTTT-CCGTAGGTGAA-3'和 5'-GCTACGTTCTTCATCGAT-3'。
在200μl离心管中进行，反应总体积为30μl，反应体系包括10×PCR缓冲液3μl，二氯化镁（25mmol/L）2.4μl,dNTP（10mmol/L）0.6μl,鉴别引物（30μmol/L）各0.5μl,高保真TaqDNA聚合酶（5U/μl）0.2μl,模板1μl,无菌超纯水21.8μl。
95℃预变性4分钟，循环反应30次（95℃30秒，55～58℃30秒，72℃30秒)，72℃延伸5分钟。
取PCR反应液，置500μl离心管中，进行酶切反应，反应总体积为20μI，反应体系包括10×酶切缓冲液2μl,PCR反应液6μl,SmaI(10U/μl)0.5μl，无菌超纯水11.5μl，酶切反应在30℃水浴反应2小时。另取无菌超纯水，同法上述PCR-RFLP反应操作，作为空白对照。
照琼脂糖凝胶电泳法(通则0541)，胶浓度为1.5%，胶中加人核酸凝胶染色剂GelRed。
供试品与对照药材酶切反应溶液的上样量分别为8μl,DNA分子量标记上样量为1μl(0.5μg/μl)。
电泳结束后，取凝胶片在凝胶成像仪上或紫外透射仪上检视。供试品凝胶电泳图谱中，在与对照药材凝胶电泳图谱相应的位置上，在100～250bp应有两条DNA条带，空白对照无条带。
检查
杂质 · 水分 · 限量检查不得过15.0%(通则0832第二法）。
不得过5.0%(通则2302)。
浸出物
照醇溶性浸出物测定法(通则2201)项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于7.0%。
贮藏
储存条件置通风干燥处，防蛀。
性味与归经
性味 · 归经苦、甘，微寒。归肺、心经。
功能与主治
功效 · 主治清热润肺，化痰止咳，散结消。用于肺热燥咳，干咳少痰，阴虚劳嗽，痰中带血，瘰。橛，肺痈。
用法与用量
临床用法3～10g;研粉冲服，一次1～2g。
注意
不宜与川乌、制川乌、草乌、制草乌、附子同用。
图谱
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